第五章 酶_工学_高等教育_教育专区。第五章 酶 主要内容：介绍酶的概念、作用特点 和分类、命名，讨论酶的结构特征和催化 功能以及酶的作用机理，进而讨论影响酶 作用的主要因素 。 对酶工程和酶的应用作 一般介绍。 思考 ? 目 录
第五章 酶 主要内容：介绍酶的概念、作用特点 和分类、命名，讨论酶的结构特征和催化 功能以及酶的作用机理，进而讨论影响酶 作用的主要因素 。 对酶工程和酶的应用作 一般介绍。 思考 ? 目 录 第一节 酶的概念及作用特点 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 酶的命名和分类 酶的结构与功能的关系 酶的作用机理 影响酶促反应速度的因素 酶的活性调节 酶工程简介 维生素和辅酶 第一节 酶的概念及作用特点 一 、酶及生物催化剂概念的发展 二、 酶作用的特点 ? 极高的催化效率 ? 高度的性 ? 易失活 ? 活性可调控 ? 有的酶需辅助因子 三、 酶性类型 四、 酶的化学本质 酶及生物催化剂概念的发展 蛋白质类： Enzyme 克隆酶、遗传修饰酶 蛋白质工程新酶 (天然酶、生物工程酶) 生物催化剂 （Biocatalyst） 核酸类：Ribozyme 模拟生物催化剂 …… 酶性类型 1 结构性 概念：酶对所催化的（底物，Substrate）化 学结构的特殊要求和选择 类别：绝对性和相对性 2 立体异构性 概念：酶除了对底物的化学结构有要求外， 对其立体异构也有一定的要求 类别：旋光异构性和几何异构性 绝对性和相对性 绝对性 有的酶对底物的化学结构要求非常严格， 只作用于一种底物，不作用于其它任何物质。 相对性 有的酶对底物的化学结构要求比上述 绝对性略低一些，它们能作用于一类化合物或一种 化学键。 1） 键性 有的酶只作用于一定的键，而对键 两端的基团并无严格要求。 2）基团性 另一些酶，除要求作用于一定的键 以外，对键两端的基团还有一定要求，往往是对其中一 个基团要求严格，对另一个基团则要求不严格。 消化道内几种蛋白酶的性 氨肽酶 （芳香） （碱性） 羧肽酶 羧肽酶 （丙） 胰凝乳 蛋白酶 胃蛋白酶 弹性蛋白酶 胰蛋白酶 消化道蛋白酶作用的性 酶的化学本质及类别 单纯蛋白质酶类 据酶 组成分类 酶蛋白质 结合蛋白质酶类 辅助因子 金属离子 小有机物 单体酶 据酶蛋白 特征分类 寡聚酶 多酶复合体 第二节 酶的命名和分类 一、 命名：习惯命名；系统命名 二、 国际系统分类法及编号 *国际生物化学会酶学委员会（Enzyme Commsion）将酶 分成六大类：1.氧还原酶类，2.转移酶类，3.水解酶类，4.裂合 酶类，5.异构酶类，6.合成酶类 * 每一种酶有一个编号,如葡萄糖磷酸转移酶(己糖激酶) EC 2. 大类 7. 亚类 1. 亚亚类 1 序号 第三节 酶的结构与功能的关系 一、 酶的一级结构与功能的关系 1、必需基团：酶中有各种功能基团，如氨基、羧基、羟 基等，但并不是酶中所有的这些基团都与酶活性直接相关 ，而只是酶蛋白一定的若干功能基团才与催化作用有关。这种 关系到酶催化作用的化学基团称为酶的必需基团。常见的有组 氨酸的咪唑基、丝氨酸的羟基、半胱氨酸的巯基等。 必需基团可分为两类：能与底物结合的必需基团称为结合 基团 ；能促进底物发生化学变化的必需基团称为催化 基团。 2、酶原激活：有些酶在生物体内首先合成出来的只是它的无 活性的前体，即酶原。酶原在一定条件下才能成有活性的 酶，这一过程称为酶原激活。 酶原的激活过程是通过去掉中的部分肽段，引起酶分 子空间结构的变化，从而形成或出活性中心，转变成为具 有活性的酶。 3、共价修饰：应用一些化学试剂可与某些氨基酸基团发生结 合、氧化或还原等反应，生成共价修饰物，使酶的一些基 团发生结构和性质的变化。 二、 酶的活性与其高级结构的关系 1、活性中心：酶的活性不仅取决于其一级结构，而且与其高 级结构密切相关。就某种程度而言，在酶活性的表现上，高级 结构甚至比一级结构更为重要，因为只有高级结构才能形成活 性中心。通常把酶上必需基团比较集中并构成一定空间构 象、与酶的活性直接相关的结构区域称为酶的活性中心。 活性中心通常包括两部分：与底物结合的部分称为结合中 心；促进底物发生化学变化的部分称为催化中心。 实例:胰凝乳蛋白酶 2、二级结构、结构与酶活性的关系： 酶的二级结构、结构是所有酶都必须具备的空间结构 ，是维持酶的活性部位所必需的构象。当酶蛋白的二级结构和 结构彻底改变后，就会使酶的空间结构遭到从而使其 催化功能。 另外，有时使酶的二级结构和结构发生改变，能使酶 形成正确的催化部位从而发挥其催化功能，如底物与酶之间的 契合。 3、四级结构与酶活性的关系：聚合与解聚 具有四级结构的酶，按其功能可分为两类：一类与催化作 用有关，另一类与代谢调节有关。 只与催化作用有关的具有四级结构的酶由几个相同或不同 的亚基组成，每个亚基都有一个活性中心。四级结构完整时， 酶的催化功能才会充分发挥出来，当四级结构被时，亚基 被分离，若采用的分离方法适当，被分离的亚基仍保留着各自 的催化功能。 在一些调节酶中，其结构常常是寡聚蛋白，酶的活性 通过亚基的聚合与解聚来调节。有的酶在聚合态时是有活性， 解聚成亚基后为非活性态。 4、同功酶—高级结构与酶活性关系的典型： 同功酶指的是能催化相同的化学反应，但其酶蛋白本身的 结构组成不同的一组酶。 同功酶的结构主要表现在非活性中心部分不同或所含亚基 组合情况不同。对整个酶而言，各同工酶与酶活性有关的 部分结构相同。如乳酸脱氢酶有5种同工酶。 第四节 酶的作用机理 一、 酶促反应的本质 二、 酶作用性机理 三、 与酶的高效率有关的主要因素 酶促反应的本质 1、酶是催化剂，遵从一般催化剂的规律：A、能加速化学反 应速率，反应前后质和量都无改变；B、只能加速在热力学上 有可能进行的化学反应；C、只能缩短化学反应时间，而不能 改变化学反应的平衡点；D、催化可应的酶对正反应和逆 反应都有催化作用； 2、加速反应的本质：降低活化能； 3、中间产物学说：酶的工作方式。 酶催化的中间产物理论 k2 ? ?? E ? S? ES ? ?? P ? E ?? k1 k ?1 酶（E）与底物（S） 结合生成不稳定的中间 物（ES），再分解成产 物（P）并出酶，使 反应沿一个低活化能的 途径进行，降低反应所 需活化能，所以能加快 反应速度。 P+ E 反应过程 能 量 水 平 ?E1 ES ?E2 E+S ?G 酶作用性机理 锁钥学说：将酶的活性中心比喻作锁孔，底物分 子象钥匙，底物能性地插入到酶的活性中心。 契合学说：酶的活性中心在结构上具柔性，底 物接近活性中心时，可酶蛋白构象发生变化，这 样就使使酶活性中心有关基团正确排列和定向，使之 与底物成互补形状有机的结合而催化反应进行。 酶性的“锁钥学说” 酶性的“契合学说” 四、与酶的高效率有关的主要因素 1、 邻近与定向效应 2、 契合与底物扭曲变形 3、 共价催化 4、 酸碱催化 5、微影响 酶中可作为亲核基团和酸碱催化的功能基团 Ser195 102Asp His57 A.酶中的电荷中继网 Ser195 His57 Asp102 Ser195 102Asp Ser195 底物 His57 Asp102 His57 B.加上底物后，从Ser转移一个质子给His， 带正电荷的咪唑基通过带负电荷的Asp静电 相互作用被稳定 胰凝乳蛋白酶 中催化三联体构象 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1） 底物 结合底物 形成共价 ES复合物 His57 质子供体 C-N键断裂 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2） 羰基产物 水亲核 四面体中间物 的 羧基产物 酶的活性中心和必需基团 酶中直接与底物结合，并和酶催化作用直接 有关的区域叫酶的活性中心（active center）或活性部 位（active site），参与构成酶的活性中心和维持酶的 特定构象所必需的基团为酶的必需基团。 实例；胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin） 羧肽酶（ribonuclease） 胰 凝 乳 蛋 白 酶 的 活 性 中 心 Ser His 活性中心重要基团: His57 , Asp102 , Ser195 Asp 为Tyr 248 为Arg 145 为Glu 270 为底物 羧肽酶活性中心示意图 Zn 第五节 影响酶促反应速度的因素 （酶促反应动力学） 一、酶促反应速度的测定与酶的活力单位 二、影响酶反应速度的因素 酶促反应速度的测定与酶的活力单位 1、酶促反应速度的测定 初速度的概念 2、酶活力 检测酶含量及存在，很难直接用酶的“量”（质量、体积、 浓度）来表示，而常用酶催化某一特定反应的能力来表示酶量， 即用酶的活力表示。 酶催化一定化学反应的能力称酶活力，酶活力通常以最适条 件下酶所催化的化学反应的速度来确定。 3、酶活力的表示方法 4、酶活力测定方法：终点法 动力 酶活力测定方法 终点法: 酶反应进行到一定时间后终止其反应， 再用化学或物理方法测定产物或反应物量的变化。 动力:连续测定反应过程中产物\底物或辅酶 的变化量，直接测定出酶反应的初速度。 酶活力的表示方法 活力单位（active unit） 量度酶催化能力大小 习惯单位（U）: 底物(或产物)变化量 / 单位时间 国际单位（IU）: 1μmoL变化量 / 分钟 Katal（Kat）：1moL变化量 / 秒 比活力（specific activity） 比活力= 总蛋白mg数 总活力单位 量度酶纯度 = U(或IU) mg蛋白 量度转换效率 转换系数（turnover number） 底物数/ 秒· 每个酶或底物（ μ moL）/ 秒· 每微摩尔酶 影响对酶反应速度的因素 1、酶浓度 当S足够过量，其它条件固定且无不利因素时，v=k[E] 2、底物浓度 3、pH （最适 pH的概念） 4、 温度 （最适温度的概念） 5、激活剂 6、剂 底物浓度对酶反应速度的影响 1、酶反应速度与底物浓度的关系曲线 （Michaelis—Menten曲线、米氏方程的提出及推导 3、米氏的意义 4、米氏的测定 单酶促反应的米氏方程及Km k2 ? ?? ES ? E ? S? ?? P ? E ?? k ?1 k1 米氏方程: Vmax ?S ? v? K m ? ?S ? 米氏: k ?1 ? k2 Km ? k1 推导原则：从酶被底物饱和的现象出发，按照 “稳态平衡”的设想进行推导。 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 S?E ?S ? ?Et ? ? ?ES? k1 ? ?? ? ?? k ?1 ES ?ES? k2 P? E ? ?? [ES]生成速度： v1 ? k1 ??Et ? ? ?ES???S ? ，[ES]分解速度： v2 ? k?1?ES? ? k2 ?ES? 米 氏 方 程 的 推 导 当酶反应体系处于恒态时： 即： 令： k1 ??Et ? ? ?ES???S ? ? k?1?ES? ? k2 ?ES? k?1 ? k2 ? Km k1 ?Et ??S ? ? ?ES??S ? ? k?1 ? k2 ? ?ES? k1 则： Km ?ES? ? ?ES??S ? ? ?Et ??S ? (1) v1 ? v2 经整理得： ?ES? ? ?Et ??S ? K m ??S ? 由于酶促反应速度由[ES]决定，即 将（2）代入（1）得： v ? k2 ?ES? ，所以 ? ?ES? ? ?Et ??S ? v ? k2 K m ? ?S ? 所以 ?v k2 ?Et ??S ? (3) Km ? ?S ? v k2 (2) 当[Et]=[ES]时， v ? Vm Vm ? k2 ?Et ? (4) 将（4）代入（3），则： v? Vmax ?S ? K m ? ?S ? 米氏的意义 * 当v=Vmax/2时，Km=[S]（ Km的单位为浓度单位） * 是酶在一定条件下的特征物理，通过测定Km的 数值，可鉴别酶。 * 可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，E对S的亲合 力愈大，Km愈大，E对S的亲合力愈小。 *在已知Km的情况下，应用米氏方程可计算任意[s]时的 v，或任何v下的[s]。（用Km的倍数表示） 题：已知某酶的Km值为0.05mol.L-1，要使此酶所催化的反 应速度达到最大反应速度的80％时底物的浓度应为多少？ 米氏的测定 基本原则： 将米氏方程变化成相当于 y=ax+b的直线方程， 再用作图法求出Km。 例：双倒数作图法（Lineweaver-Burk法） 米氏方程的双倒数形式： 1 Km 1 1 — = —— . — + —— v Vmax [S] Vmax 酶动力学的双倒数图线 酶促反应初速度的概念 [P] 斜率=[P]/ t = V（初速度） t pH对酶反应速度的影响 v ?过酸过碱导致酶蛋白变性 ?影响底物解离状态 ?影响酶解离状态 ?影响酶的活性中心构象 最适 pH pH 温度与酶反应速度的关系 ? 在达到最适温度以前，反 应速度随温度升高而加快 ? 酶是蛋白质，其变性速度 亦随温度上升而加快 ? 酶的最适温度不是一个固 定不变的 v 温度 激活剂对酶作用的影响 凡是能提高酶活性的物质，称为酶的激活剂（activator） 类别 金属离子：K+、Na+、 Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+ 、 Co2+、Fe2+ 阴离子： Cl-、Br- 有机 还原剂：抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽 金属螯合剂：EDTA 剂对酶作用的影响 凡是使酶的必需基因或酶的活性部位中的基团 的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全 活性的物质，叫酶的剂（inhibitor） 。 类型：不可逆剂 可逆剂 应用：研制杀虫剂、药物 研究酶的作用机理，确定代谢途径 剂类型和特点 非性不可逆剂 不可逆剂 性不可逆剂 竞争性剂 可逆剂 非竞争性剂 竞争性作用 E+S + I ES P+ E 实例：磺胺药物的药用机理 H2N-SO2NH2 H2N-COOH EI 叶酸 对氨基苯磺酰胺 对氨基苯甲酸 蝶呤 对氨基苯甲酸 谷氨酸 非竞争性作用 E+S + I ES + I P+ E EI+S ESI 实例：重金属离子（Cu2+、Hg2+、Ag+、Pb2+） 金属络合剂（EDTA、F-、CN-、N3-） 反竞争性作用 E+S ES + I P+ E ESI 竞 争 性 非 竞 争 性 抑 制 作 用 机 理 示 意 图 底物与酶性结合 竞争性作用 非竞争性作用 竞争性曲线 非竞争性曲线 反竞争性曲线 非性不可逆剂 剂作用于酶中的一类或几类基团，这些 基团中包含了必需基团，因而引起酶失活。 类型： 性不可逆剂 这类剂选择性很强，它只能性地与 酶活性中心的某些基团不可逆结合，引起酶的活 性。 实例：有机磷杀虫剂 O-R X P O-R O -Ser-OH O-R -Ser-O P O O-R 第六节 酶的活性调节 一、 别构酶及酶的别构（变构）效应 二、 酶的多种形式 ? 同工酶（isoenzyme） 三、 酶原的激活 酶的别构（变构）效应 ?概念：有些酶表面除了具有活性中心外，还存在被称 为调节位点（或变构位点）的调节物结合位点，调节物 结合到调节位点上引起酶的构象发生变化，导致酶的活性提 高或下降，这种现象称为别构效应（allosteric effect）,具有 上述特点的酶称别构酶（allosteric enzyme）。 ?实例：天冬氨酸转氨甲酰酶 （anspartate transcarbamoylase，ATCase） 酶的别构（变构）效应示意图 效应剂 别 构 中 心 活性 中心 a--非调节酶 b--正协同别构酶 的S形曲线 别构酶的动力学曲线 ATCase的结构及其催 化链的别构效应 C C C C ATP（正效应剂） CTP（负效应剂） C R R C C R R R R R R R R R R C C C C C 无催化活性构象(T-型) 有催化活性构象(R-型) 别构酶的序变模型 S S S S S S S S S S S S S S 亚基全部 处于R型 亚基全部 处于T型 依次序变化 别构酶的齐变模型 T状态（对称亚基） S S S S S S S S S S S S S S T状态（对称亚基） 对称亚基 齐步变化 对称亚基 酶的多种形式——同工酶 概念：能催化相同的化学反应，但其酶蛋白本身的分 子结构组成不同的一组酶，称之为同工酶（isoenzyme） 实例：乳酸脱氢酶 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 结构基因 a b 乳酸脱氢酶同 工酶电泳图谱 mRNA – 多肽 亚基 点样线 + 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 LDH1(H4) LDH2(H3M) LDH3(H2M2) LDH4(HM3) LDH5(M4) 心肌 肾 肝 骨骼肌 血清 + - 原点 酶原的激活 在体内处于无活性状态的酶前身物（酶原， zymogen）在一定条件下被修饰转变成有活性的酶 的过程称酶原的激活。其实质是酶原被修饰时形成 了正确的构象和活性中心，由此可见酶的 特定结构和酶的活性中心的形成是酶具有催化 活性的基本。 实例：胰蛋白酶原的激活 肠 激 酶 胰蛋白酶原 六肽 活性中心 胰蛋白酶 胰蛋白酶原的激活示意图 第七节 酶工程简介 将酶学和工程学相结 一、化学酶工程 ?天然酶 ?固定化酶 ?化学修饰酶 ?人工模拟酶 合，产生了酶工程 (enzyme engineering)这 样一个新的领域。酶工 程主要研究酶的生产、 纯化、固定化技术、酶 结构的修饰和 以及在工农业、医药卫 生和理论研究等方面的 二、生物酶工程 ?克隆酶 ?突变酶 应用。 ?新酶 固定化酶 将水溶性酶用物理或化学方法处理，固定于高支持物 ( 或载体 ) 上而成为不溶于水，但仍有酶活性的一种酶制剂形 式，称固定化酶(immobilized enzyme)。 吸附法 包埋法 共价偶联法 交联法 溴 化 氰 亚 氨 碳 酸 基 偶 联 法 OH OH （多羟基载体） BrCN O—C —N OH H2O （活泼） O O C=NH O-CONH2 （惰性） OH H2N-E OH O-CO-NH-E OH O O C=N-E O-C-NH-E NH 戊二醛交联法 OHC(CH2)3CHO 戊二醛 H2N-E -HC=N-E-N=CH（CH2）3-CH=N- EN CH N CH 酶的和模拟 酶的：功能基团的化学修饰酶 酶蛋白侧链的化学修饰 酶内或间的交联反应 酶的模拟：根据酶作用的原理摸拟酶的活性中心 和催化机理，用化学方法制备结构较简单,高效、 高选择性、稳定性能好的新型催化剂,可以是无机 化合物、有机化合物或小肽。 人工模拟酶?-benzyme 催 化 侧 链 环糊精 结构 环糊精 环糊精结构 模型 催化侧链连接到环糊精上， 可模拟胰凝乳蛋白酶 生物酶工程示意图 遗传设计 酶的蛋白质结构功能 新酶蓝图 选择性修饰方案 DNA重组 技术 新酶 突变酶 克隆酶 遗传修饰 效用 发 展 DNA重组 技术 酶基因 产品 第八节 维生素和辅酶 一、 维生素及其与辅酶的关系 ? 维生素（vitamin）——维持机体正常生命活动不可缺少 的一类小有机化合物，人和动物不能合成它们，必须从 食物中摄取。维生素可分为脂溶性（ A，D，K，E）和水溶 性两大类。当人体缺乏某种维生素时，则相应代谢受阻，出 现维生素缺乏症。 ? 多数水溶性维生素作为辅酶的主要成分，或本身就是辅 酶参与体内代谢过程。 二、 重要的水溶性维生素及相应辅酶 重要的水溶性维生素及相应辅酶 1 维生素pp：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+） 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+） 2 维生素B2：黄素单核苷酸（FMN） 黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 3 维生素B1：焦磷酸硫胺素（TPP） 4 泛酸： 辅酶 A（CoA） 5 维生素B6：磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺 6 叶酸： 四氢叶酸（FH4） 7 生物素 8 维生素C 9 硫辛酸 10 维生素B12 主要可溶性维生素和相应辅酶 维生素 1. B1(硫胺素) 辅酶 TPP 功能 α -酮酸氧化脱羧 2. B2(核黄素 ) 3. PP [尼克酸（酰胺）] 4. 泛酸（遍多酸） FMN、FAD NAD+、NADP+ CoASH 氢载体 氢载体 酰基载体 5. B6 [吡哆醇（醛、酸）] 6. 叶酸 7. 生物素 磷酸吡哆醇（醛） FH4(THFA) 转氨、脱羧、消旋 一碳基团载体 羧化辅酶 8. C（抗坏血酸） 9. 硫辛酸 氧化还原作用 酰基载体、氢载体 变位酶辅酶 10. B12（氰钴氨素） 一碳基团载体 维生素pp和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸） NAD(P)+ AMP NAD+: R=H NADP+: R=PO2H2 R NAD(P)++2H 尼克酰胺 核苷酸 NAD(P)H+H+ 维生素B2和黄素单核苷酸（FMN）.黄素腺嘌呤二核苷（FAD） 核 黄 素 FMN FAD AMP FMN +2H FMNH2 FAD+2H FADH2 泛酸和 辅酶 A（CoA） 维生素B1和焦磷酸硫胺素（TTP） 维生素B6和磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺 叶酸和 四氢叶酸（FH4） 叶 酸 蝶呤 对氨基苯甲酸 谷氨酸 四 氢 叶 酸 H 5 10 H 维生素C 硫辛酸 氧化型硫辛酸 还原型硫辛酸 羧 基 生 物 素 COOH 维生素B12 脂溶性维生素 一、 维生素A和胡萝卜素 环己烯不饱和一元醇，包括两种：A1、A2 化学名称： A1为视黄醇; A2为脱氢视 黄醇。 A2 的生理活性只有A1的40%。 1、 结构 环己烯不饱和一元醇，包括两种：A1、A2 2、 维生素A的来源 A1主要存在于哺乳动物及咸水鱼的肝脏；A2 主要存在于淡水鱼的肝脏； 绿色植物中未发现维生素A，而含有维生 素A原，即胡萝卜素。 β- 胡萝卜素、 α- 胡萝卜素、 γ胡萝卜素、黄玉米色素在肝脏、 肠粘膜内成A。 β-胡萝卜素 成二个维生 素A（一切有色蔬菜） α-胡萝卜素 γ-胡萝卜素 黄玉米色素 成一个维生素A 3、 功能 与视觉有关。 缺乏症：夜盲症。 活性形式：11-顺式视黄醛 二、 维生素D 1、结构 固醇衍生物 D3：胆钙化固醇（动物） D2：麦角钙化固醇（植物） 2、 来源 （1）维生素D原来源 ：鱼肝油、牛奶、蛋黄、 肝、肾等。 （2）D原 酵母、真菌、植物中： 麦角固醇（D2原）?维生素D2 （麦角钙化固醇） 动物体内： 7一脱氢胆固醇（D3原） ? 维生素D3 （胆钙化固醇） 3、 功能 调节钙磷代谢，维持血中钙磷正常水平。 D3：提高血钙、血磷水平，促进新骨的生成与 钙化。 缺乏症：佝偻症等。 三、 维生素E 化学名称：生育酚 苯骈二氢吡喃的衍生物 1、 结构 2、 来源 植物油：麦胚油、玉米油、花生油、棉子油、蛋黄、 牛奶、水果等。 3、 功能 机理： 抗氧化剂， 清除氧基，对抗生物膜中 不饱和脂肪酸的过氧化，生物膜的结构与功能 生理功能： （1）抗动物不育症 （2）促进血红素合成，延长红细胞寿命，防止非缺铁 性贫血 缺乏症： （1）不育症 （2）红细胞减少，贫血 四、 维生素K 1、结构 2-甲基-1、4-萘醌的衍生物 2、 来源 K1：绿色蔬菜、动物肝脏 K2：肠道微生物合成（大肠杆菌、乳酸菌） K3：临床使用的合成物 3、 功能 促进肝脏中凝血酶原的合成。 缺乏症：凝血时间延长，肌肉、胃肠道出 血。 问答题 1、影响酶促反应的因素有哪些？它们是如何影响的？ 2、试比较酶的竞争性作用与非竞争性作用的异同。 3、什么是米氏方程，米氏Km的意义是什么？试求酶反应速度达到最 大反应速度的99％时，所需求的底物浓度（用Km表示） 4、什麽是同工酶？为什麽可以用电泳法对同工酶进行分离？同工酶在科学 研究和实践中有何应用？ 5、举例说明酶的结构和功能之间的相互关系。 6、称取25毫克某蛋白酶制剂配成 25毫升溶液，取出1毫升该酶液以酪蛋白 为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力 ,得知每小时产生1500微克酪氨酸。另 取2毫升酶液，用凯式定氮法测得蛋白氮为 0.2毫克。若以每分钟产生1微克 酪氨酸的酶量为一个活力单位计算，根据以上数据，求出（1）1毫升酶液 中含有的蛋白质和酶活力单位数；（2）该酶制剂的比活力；（3）1克酶制 剂的总蛋白含量和酶活力单位数。 名词解释 活性中心 契合 全酶 酶原 活力单位 比活力 米氏方程 Km 变构效应 ribozyme 辅酶和辅基 固定化酶